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病理學診斷常用的方法范文1

自檢是發現乳腺癌的一種很好的途徑，在我國，大多數乳腺癌是患者自己首先發現的。自檢可以安排在洗澡后，對著鏡子仔細觀察自己兩側是否對稱，是否存在內陷或抬高，皮膚是否存在局部凹陷或其他異常改變。然后，仰臥于床上，兩手分別觸摸對側整個和腋窩，檢查有無異常硬節。檢查中切忌抓捏。建議自青春期開始，女性每月進行一次自檢。

自檢中一旦發現可疑跡象，應及時到醫院乳腺專科門診進行乳腺鉬靶 X線攝影檢查和B超檢查，以進一步明確診斷。目前，公認乳腺鉬靶X線攝影檢查和B超檢查是臨床上最常用且最有效的乳腺癌輔助檢查手段。

由于乳腺鉬靶X線攝影檢查可以觀察到臨床觸摸不到腫塊的早期乳腺癌，尤其是新一代數字式乳腺鉬靶X線攝影檢查使圖像更清晰，早期乳腺癌的診斷率更高，其鑒別良、惡性腫瘤的準確率甚至可達90%以上。實踐也表明，50歲以下的乳腺癌患者，有85% 是由乳腺鉬靶X線攝影檢查發現的。而乳腺鉬靶X線攝影普查，可使50歲以上婦女乳腺癌死亡率下降30％。因此，美國癌癥協會提出以下建議:35～39 歲的女性應進行一次乳腺鉬靶X線攝影檢查;40歲以后每一兩年檢查一次; 50歲以后每年檢查一次。我國35歲以上的女性也應按照以上要求進行乳腺鉬靶X線攝影檢查，而乳腺癌的高危人群，如初潮年齡小于12歲、絕經年齡大于52歲、高齡（>35歲）初產、獨身未育、乳腺癌家族史、一側患乳腺癌、青少年時期接受過射線輻射和患乳腺良性疾病的患者，以及較嚴重的乳腺增生、纖維腺瘤、乳腺炎及乳腺外傷等患者，應1年做一次乳腺鉬靶X線攝影檢查。

B超檢查也是乳腺疾病常用的檢查方法之一，可與乳腺鉬靶X線攝影檢查結合起來使用。該方法具有無 毒,無害,簡便等特點，能鑒別良、惡性，囊、實性，增生等乳腺疾病。但超聲檢查有時會出現假陽性，對小于1厘米的腫塊確診困難。

病理學診斷常用的方法范文2

肝脂肪含量>10％：糖尿病和心血管病風險倍增

研究發現，脂肪肝常與2型糖尿病、高血壓、脂代謝紊亂密切伴隨。國外研究道，無糖尿病病史的非酒精性脂肪肝患者的糖耐量試驗結果顯示，44％存在糖代謝異常，其中約33％為新診斷的糖尿病。我院課題組研究發現：在無糖尿病病史的非酒精性脂肪肝人群中，糖代謝異常者高達50％，其中35.5％為糖尿病前期，14.5％為新診斷的糖尿病：在糖尿病患者中，脂肪肝的患病率高達80％，除糖代謝異常外，脂肪肝患者將來發生動脈粥樣硬化性疾病(如心血管病、腦血管病)的概率也明顯高于沒有脂肪肝的人群。我科的研究發現，當肝臟脂肪含量大于10％時，胰島素抵抗加重，胰島B細胞分泌功能開始受損，血糖開始升高。因此，從改善代謝、預防糖尿病和動脈硬化的角度出發，脂肪肝患者應當把肝臟脂肪含量控制在10％以下。

測定肝臟臘肪含量：普通超聲、CT、磁共振均“不給力”

目前常用的診斷脂肪肝的方法包括：B超、CT、磁共振、肝臟穿刺病理學診斷等。其中，肝臟穿刺病理學診斷最精確，但該檢查有一定的創傷性，不適用于大樣本普查和檢測。B超是目前最常用的檢測方法，但只有當肝脂肪含量達到20％～30％時才能被檢測出來，輕度脂肪肝患者往往容易被漏診，不利于脂肪肝的早期診斷。同時，B超只能判斷患者是否存在脂肪肝，或者粗略判斷脂肪肝的輕重程度，無法精確判斷肝臟的脂肪含量，也無法判斷治療后肝臟脂肪到底減了多少。CT、磁共振與B超類似，也無法對肝臟脂肪進行精確定量。

病理學診斷常用的方法范文3

【關鍵詞】病理學教學；病例教學法；體會

【中圖分類號】R-4【文獻標識碼】A【文章編號】1672-3783（2014）01-0373-01病理學是基礎和臨床醫學之間的橋梁學科，具有較強的實踐性。病例教學以臨床病例和臨床問題為材料，引導學生將病變與臨床表現相互聯系，并通過討論提高學生理論聯系實際的臨床思維能力，已成為目前醫學教育改革中的一個熱點[1]。筆者將自身應用病例教學法的體會和經驗淺談如下。

1 重視病例資料的收集和整理

收集整理臨床病例資料是有效實施病例教學的第一步，我們主要根據以下原則進行病例挑選。首先依據教學大綱的要求，選擇典型、適用、具有現實性的病例。比如，在總論中講解急性炎癥時，可以選擇急性蜂窩織性闌尾炎，這種病例雖然簡單，但可以比較全面的闡明教學要點。其次，病例收集盡可能完整，包括臨床資料、實驗室檢查及影像學檢查等。最后，對所收集的病例進行加工處理并制成課件。多媒體技術為課堂教學提供了一種有效的實施手段，充分利用多媒體技術，可以把整個病例及相關的圖片制成圖、文、聲、動畫并茂的課件，很受學生歡迎。在制作課件時，注重圍繞疾病的臨床表現、發生發展過程、診斷依據等展開，突出強調臨床表現與病理變化之間的相互聯系，并注意其他學科相關知識的運用及貫通。其實，在我們進行臨床病例選擇時，發現不典型病例比較多見。比如，都是急性闌尾炎，有些病例臨床表現和病理特征典型，有些就不典型。對此，我們嘗試根據學生層次的差別，適當挑選少量不典型病例貫穿于教學實踐中。經過對比教學后發現，不典型病例的討論可以增加學生深入思考的學習機會，提高學生對不同疾病的診斷、鑒別診斷以及全面客觀認識疾病的能力。除此之外，我們嘗試將部分病例的臨床處理措施及患者病情轉歸列入課堂教學的內容中，收到了較好的教學效果，學生學習的興趣和積極性確有提高。

2 注意加強學生相關醫學知識的學習

病理學是形態學科，實踐性很強，而疾病的病因及進展是復雜、動態的，學好這門課程涉及多個學科，尤其是臨床醫學知識。在病理課教學過程中，大多數學生尚處于低年級醫學學習階段，他們尚未接觸診斷學以及婦、幼、內、外等臨床學科，因此，在進行病例教學時，需要教師全面引導并逐步拓展學生對疾病的認識[2]。我們常用的方法是課前導入法。該方法要求在新課講授的前一次課時布置好預習內容，將典型病例發給學生，并對病例進行簡單說明，使學生能夠通過病例引導預習新課內容。這種方法可以充分發揮學生的主動性。需注意的是，教師應對一些臨床術語、檢驗結果在病史上作注釋，以免學生花費過多的時間查閱臨床書籍，糾結一些難以在現階段理解的臨床問題，失去對病例討論的興趣。另外，我們還嘗試向學生推薦閱讀一些較為簡易的臨床醫學教材讀物，讓他們對一些臨床知識先建立初步印象和概念，以利于課堂病例教學的展開。

3 強調病例教學法的實施技巧

與純理論講授相比，病例教學具有生動、趣味的特點。但是，教師需要清楚，如果認為只要引入病例教學就可以提高學生學習病理學的興趣和教學質量是不對的。病例教學有許多技巧，技巧應用是否得當將直接影響學生學習病理課程的興趣和積極性以及教學效果。比如，多數教師喜歡帶領學生進行病例討論，此時應注意鼓勵學生不同看法和不同觀點的提出，靈活調節課堂氣氛。在討論結束時，教師要及時對病例進行總結，對理論知識做到恰到好處的升華，使學生逐步理清思路、鞏固所學的基礎知識。此外，還可以采用定期病例考核評價的辦法，來評估已實施的病例教學是否達到教學目的，學生是否已牢固掌握知識要點，從而較為客觀地評價教學效果和學生學習知識的深度及廣度，及時調整教學方式和改進教學方法。最后，還需要注意合理分配課堂講授時間，因為展開病例教學引導學生進行討論往往會花費比較多的時間，這會在一定程度上影響基礎理論知識的講授，作為理論課授課老師，我們需要清楚教科書理論知識的清楚闡述是進行病例討論的基礎和前提，病例教學是講解理論知識的輔助手段，二者不可本末倒置。

4 注重病理學教師自身素質的不斷提高

病例教學法要求教師具有豐富的教學經驗及一定的臨床知識，須掌握相關專業及相關學科知識，這就促使教師不斷學習，提高自身素質。課前需要教師充分理解教材，精心做好病例設計，找出教學中的重點和難點，將病例與病理基礎知識點密切相連。課中需要教師合理引導和啟發學生進行發散性思維和創造性思維，需對有關問題進行正確、精煉而又合理的解釋，并且具有駕權一個充分而又熱烈的討論課堂的能力。這些都是對教師業務能力的挑戰。筆者所在學校，校方經常鼓勵教師參與教學改革，鼓勵并督促教師定期學習教育學、心理學等學科，以便更好地把握學生學習的心理特點。另外，病理學教研室還很重視加強新教師崗前培訓，建立新教師聽課和試講課制度，注重發揮高年資教師的傳、幫、帶作用。這些都對提高病理學科的教學質量和授課老師的教學水平有著積極的作用，有利于病例教學法的實施和應用。

結語

通過在病理理論課教學中引入病例教學，筆者體會到，合理靈活地實施病例教學對于提高學生學習興趣和培養學生臨床思維分析能力具有重要的意義，值得積極推廣和應用。

參考文獻

病理學診斷常用的方法范文4

[關鍵詞]子宮頸癌；巴氏細胞學；液基細胞學；人瘤病毒

[中圖分類號] R711.74 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-4721（2016）10（c）-0140-03

[Abstract]Objective To explore effect of the traditional pap smear cytology，liquid based cytology and human papillomavirus （HPV） application of DNA detection in the screening of patients with cervical cancer.Methods 800 patients with cervical cancer in our hospital from January 2013 to February 2016 were selected as the research object，the patients were given conventional pap smear cytology，liquid based cytology，human papillomavirus DNA screening and colposcopy in screening patients with pathological results as the final standard，the different inspection methods of the inspection results were compared.Results 800 cases of patients with pap smear screening showed that 102 cases were positive （12.8%），the results of liquid based cytology showed 112 cases were positive （14.0%） the screening method，HPV DNA positive patients showed 205 cases （25.6%），pathology screening results showed 103 cases （12.9%）.The results of screening and screening results of liquid based cytology and pathology The highest consistency，which had significant difference with other two kinds of screening methods for comparison （P

[Key words]Cervical cancer；Pap smear cytology；Liquid based cytology；Human papilloma virus

子宮頸癌是當前臨床極為常見的一種婦科惡性腫瘤疾病，其在全球范圍內的病發率高居女性惡性腫瘤疾病病發率的第二位，對患者生命安全造成嚴重威脅，也對整個社會造成了嚴重負擔[1]。臨床統計顯示[2]，近年來宮頸細胞學篩查方法的普遍應用，宮頸癌以及癌前病變更早的發現并接受治療，宮頸癌患者的病發率、死亡率均呈現出明顯的下降趨勢。傳統巴氏細胞學篩查、液基細胞學篩查以及人瘤病毒（HPV）DNA檢測均是當前臨床子宮頸癌患者較為常用的檢測方法，而當前臨床針對上述檢查方法的優劣之處也仍然缺乏較為一致的認識[3]。本研究對比三種檢測方法在子宮頸癌患者篩查中的應用效果并分析其優點與缺點，現報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料

選取2013年1月～2016年2月在我院就診并接受子宮頸癌篩查的患者800例作為研究對象，年齡20～70歲，平均（40.2±10.5）歲。本組患者過往細胞學篩查結果顯示存在意義不明的不典型鱗狀細胞復查者或者具有其他高危因素患者，同時本組患者均存在性生活史。本研究中排除有妊娠、子宮切除病史、宮頸上皮內瘤病治療史的患者[4]。此外，本研究經我院倫理委員會批準，治療前告知患者具體篩查方法并征得患者同意后簽訂責任書。

1.2篩查方法

①巴氏涂片法篩查：患者首先給予常規婦科篩查以確保其他方面無異常，同時在采集標本前使用拭子清除患者宮頸表面的黏液以及細胞碎片，使用掃帚樣的塑料刷對患者宮頸外口、宮頸管進行清理，最大程度地清除上述組織表面的脫落細胞。而后將95%乙醇溶液均勻涂抹于玻璃片上并固定15～20 min，使用蘇木精-伊紅（上海銳谷生物科技有限公司）染色后封片，完成巴氏涂片法篩查操作。

②液基細胞學篩查：患者首先給予常規婦科篩查以確保其他方面無異常，采集標本前同時清除患者宮頸表面黏液、細胞碎片，刷取患者宮頸外口、宮頸管。而后將塑料刷上剩余的細胞置于事先準備好的Thin-Prep保存液小瓶中，對其進行攪拌、漂洗后將采集到的標本置于ThinPrep 2000程控超薄檢測系統（美國Cytyc公司）中進行自動處理以及制片，最后得到的玻璃片使用95%乙醇溶液固定15～20 min后，進行蘇木精-伊紅染色后封片，完成液基細胞學篩查。

③HPV NDA篩查：本研究中使用專用取樣器（美國Digene公司）完成標本采集，將取樣器插入患者宮頸外口后順時針或者逆時針轉動3圈，而后緩慢抽出取樣器并將其置于保存液瓶中。而后使用該公司生產的HPV DNA試劑盒，經過裂解、雜交、捕獲、反應、沖洗以及收集信號、判讀等一系列進程，完成對高危險性人瘤病毒的檢測。

本研究中巴氏細胞學篩查、液基細胞學篩查的結果均使用世界衛生組織（WHO）制定的2001TBS分級系統（宮頸細胞學報告結果）進行判定[5]。同時本研究中所有患者均給予陰道鏡篩查，對篩查結果存在異常以及上述三種篩查方法中篩查結果為陽性實施病變部位或者常規宮頸的3、6、9、12點活檢，有必要者實施頸管搔刮術篩查。

1.3觀察指標

篩查結果顯示為陽性：細胞學篩查結果顯示為無明確意義的非典型細胞的改變（ASC-US）及以上改變，同時本組患者若篩查結果顯示為相對光單位值（RLU value）或閾值（cut off value）≥1.0，則可以判定患者為雜交俘獲試驗陽性（HPV DNA陽性）[6-7]。

此外，患者病理學陽性判定標準則包括篩查結果為子宮頸上皮不典型增生（CIN）Ⅰ級以及其以上程度的病變。本研究中將病理學篩查結果顯示為

1.4統計學分析

采用SPSS 18.0統計學軟件對數據進行處理，計數資料以率（%）表示，采用χ2檢驗與Kapper檢驗，以P

2結果

本研究中800例患者巴氏涂片法篩查結果顯示陽性者102例（12.8%），其中包括ASC-US患者53例（52.0%）、不典型鱗狀細胞癌（ASC-H）6例（5.9%）、不典型腺細胞癌（AGC）1例（1.0%）、輕度麟狀上皮內病變（LSIL）29例（28.4%）、高度麟狀上皮內病變（HSIL）13例（12.7%）。

液基細胞學篩查結果顯示陽性者112例（14.0%），其中ASC-US患者57例（47.5%）、ASC-H5患者5例（4.5%）、AGC患者8例（7.1%）、LSIH患者20例（17.9%）、HSIL患者22例（19.6%）。

HPV DNA篩查方法顯示陽性患者205例（25.6%），其中CINⅠ級患者59例（28.8%）、CINⅡ級患者37例（18.0%）、宮頸鱗狀細胞癌患者7例（3.4%）。CINⅠ級以上患者共103例，占所有篩查患者的12.9%。

本研究中病理學篩查結果顯示為103例（12.9%），將巴氏涂片法檢測結果（57例，7.1%）與患者病理學檢測結果比較，差異有統計學意義（χ2=14.69，P0.05）；HPV DNA篩查法（90例，11.3%）與患者病理學檢測結果比較，差異無統計學意義（χ2=1.00，P>0.05）。同時在103例陽性患者中，巴氏涂片法、液基細胞學以及HPV DNA篩查所得結果如表1所示。以液基細胞學篩查結果與病理學篩查結果一致性較高，與其他兩種篩查方法結果比較，差異有統計學意義（P

3討論

有關統計顯示[8]，2010年全球新增子宮頸癌患者數量約46.6萬，而我國新增子宮頸癌患者約占所有新增子宮頸癌患者的28.8%，患者數量約13.2萬。同時全球范圍內每年子宮頸癌患者病死數量約29萬，我國每年病死的子宮頸癌患者數量則有3萬左右，對患者及其家庭均造成了嚴重影響[9]。多項臨床研究顯示[10-11]，近年來我國子宮頸癌患者的病發率、死亡率均呈現逐年上升的趨勢，患者年齡則呈現越來越年輕化的趨勢，給整個社會都造成了非常不利的影響。而事實上，子宮頸癌的發生、發展都是一項較為漫長的過程，患者由癌前病變發展成為浸潤癌需要至少10年的時間，同時子宮頸癌患者還存在一項較長的可逆轉的癌前病變周期，此時對患者進行診斷救治能有效降低子宮頸癌患者的病發率、死亡率，對提升患者的治療效果以及生活質量均有重要意義[12]。也正因如此，及早發現患者體內的癌前病變癥狀，對預防、治療子宮頸癌患者有非常重要的意義[13]。而當前臨床針對子宮頸癌、癌前病變患者的篩查方法則包括巴氏涂片細胞學檢查、液基薄層細胞學檢查、細胞DNA定量分析以及肉眼醋酸試驗、碘實驗、陰道鏡檢查、病毒檢測等多種方法。

本研究主要為對比巴氏細胞學、液基細胞學以及HPV DNA檢查方法的篩查效果。其中巴氏細胞學是以往臨床較為常用的一種細胞學診斷技術，其能有效地診斷子宮頸癌患者的病變癥狀，對降低患者病死率發揮了重要作用。但其實驗過程中會受到人體血細胞以及炎性細胞的遮蔽，其標本采集、涂片制作、染色檢查等多項進程中極易受到周圍環境的影響而造成檢查結果失誤，同時巴氏細胞學整體檢查結果靈敏度較低，患者假陰性率較高。有關研究顯示[14]，巴氏細胞學假陰性率甚至高達25%～50%。而HPV DNA檢測則是宮頸癌患者較為常用的一種檢測方法，其是唯一通過美國食品藥品管理局批準，能夠在臨床使用的HPV DNA檢測技術，在子宮頸癌患者診斷應用中具有較高的靈敏度以及陰性預測值[15]。然而在HPV DNA檢測方法的實際應用過程中，其也會由于抗原定位不夠準確而出現陽性檢出率較低的現象，使其在實際的臨床應用過程中受到較大程度的限制。此外，雖然該種方法具有較高的靈敏度及特異度，但是其在標本的采集、保存上要求較高，患者經濟花費較高而難以有效地在基層普及應用。液基細胞學檢查則是在巴氏細胞學檢查方法基礎上的一項升級方法，其能夠將宮頸結構內部、外在的細胞進行刷洗后將其置于固定容器中，經過離心、分層等一系列操作祛除細胞團內的黏性碎片，完成單個細胞的染色檢查工作。當前液基細胞學已經成為發達國家對宮頸癌患者的常規檢查手段，患者經濟花費較少且靈敏度相較于巴氏細胞學明顯提高[16]。但值得注意的是，液基細胞學在實際應用過程中依然存在一定的假陰性可能，針對有異常檢查結果或者檢查結果不確定的患者，醫生仍然應該結合患者陰道鏡檢查結果進行判定。

綜上所述，液基細胞學可以作為子宮頸癌以及癌前病變的首選篩查方法，其與患者病理學檢查結果一致性最高，值得臨床推廣。

[參考文獻]

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病理學診斷常用的方法范文5

動物病理學是獸醫基礎學科與臨床學科之間的橋梁，其中家禽的疾病變化比較多見，所以家禽病理標本制作及應用至關重要。學生通過觀察患病器官、組織的病理切片，認識疾病發生發展的規律，理論聯系實際，加深理解和鞏固課堂知識，培養學生掌握家禽常見疾病的病理診斷技術，能夠準確分析疾病，為疾病的診治提供基礎依據[1]。同時病理標本的制作可以滿足多門課程的教學需要，提高學生的學習興趣，節約教學成本，促進教學及考試改革，加快畜牧獸醫專業學科的應用型轉變。

1 病理大體標本及組織切片制作

1.1 取材

采取病料越新鮮越好，一般不超過死后24 h。應選擇病變部與可疑病變部切取，切取時要由表及里，有淺入深并包括周圍正常組織一部分。特殊病料應根據器官的結構特點切取。管狀、囊狀和皮膚組織應注意垂直切取（橫切）。帶有薄膜的組織，要防止切時薄膜分離和脫落。

切取組織塊大小以1.5 cm×1.5 cm×0.3 cm為宜，最厚不宜超過0.5 cm。組織塊病變一面應平整光滑，另一面可不平整，以便包埋時辨認。切取后，放入事先準備好的裝有固定液的磨口玻璃廣口瓶中，并做好標記。

1.2 固定和保存

固定的目的是迅速將組織細胞殺死，使細胞中的蛋白質、糖、脂肪等凝固，從而保持與活組織相似的結構狀態。材料取下后應迅速固定。固定液數量應為病理組織塊的5～20倍。由于一般把組織塊浸入固定液后數小時固定液滲入組織液的深度只達2～3 cm，因此可以放置冰箱內固定，使組織內酶失去作用，細菌也能停止滋生。最常用的固定液是10%的福爾馬林溶液，使用時，用40%的甲醛飽和水溶液10 mL加水90 mL配成[2]。

對具有典型病理變化的組織和器官固定和保存后貼標簽，同時制作相應的彩色卡片，并對其做詳細的病理變化描述，便于教學及考試中應用。

1.3 沖洗

固定后的組織塊應將固定液洗去。一般均用流水（自來水）沖洗12～24 h，及時沖洗尚有停止固定的作用，防止固定過度，有利于制片染色。

沖洗時如不方便用流水沖洗，也可用較大容器盛裝水浸洗，每隔一定時間換水一次。整個浸洗時間比流水沖洗應稍長一些。乙醇固定的組織材料不需沖洗。

1.4 脫水

經過固定的組織，沖洗后要進行脫水。脫水的目的在于將組織內的水分用乙醇或其他溶劑置換出來，為石蠟等其他包埋劑浸入組織創造條件。

常用的脫水劑為乙醇。由于乙醇可以任何比例與水結合，對組織穿透力強，又能使組織硬化，因而不能將組織從水中直接移入濃度高的乙醇中，應從低濃度逐漸到高濃度。脫水必須充分，否則給浸蠟造成困難。

除用乙醇作脫水劑外，還可以用正丁醇。正丁醇微溶于水，能與各種濃度乙醇混合，也能直接溶解石蠟。故組織經正丁醇脫水后，不須經二甲苯透明。用正丁醇作脫水劑，組織塊收縮降低，也不會過硬，故比乙醇優越。

1.5 透明

透明的目的是將組織內的乙醇用礦物油或植物油置換出來，并溶解石蠟，幫助石蠟浸透組織。由于經過透明劑處理的組織塊用肉眼觀察呈透明狀，故稱這一過程為透明。

常用的透明劑為二甲苯，因其穿透力較強，因而組織在二甲苯中停留時間不宜過長，一般透明時間在30 min左右即可。

1.6 浸蠟

浸蠟是指組織經過透明作用以后，放入溶化的石蠟中浸滲，使石蠟浸入組織塊中，冷卻后才能進行切片。

通常?x擇熔點在52～56 ℃的石蠟，并視切片時環境的溫度而選擇。室溫高則選用熔點稍高的石蠟，反之則選用熔點較低的石蠟，這樣可防止切片時石蠟太軟或易碎裂。

浸蠟的過程是：二甲苯石蠟混合液（1∶1），1 h；二甲苯石蠟混合液（1∶2），1 h；石蠟（1），1.5 h；石蠟（2），1.5 h。上述過程可在56～58 ℃恒溫箱中進行，含二甲苯的混合液可用磨口小瓶盛裝。

1.7 包埋

包埋就是將已浸滲好的組織包埋于浸滲劑中。根據需要，包埋的方法常有石蠟包埋法和火棉膠包埋法。

石蠟包埋法：①先將熔化的石蠟倒入包埋框，用加熱的鑷子將欲包埋的組織塊在蠟液內放置好。注意各組織塊之間的距離和每個組織塊的位置和方向。②迅速第二次往平皿內傾倒蠟液，淹沒組織塊。待蠟液出現凝固層后，即輕輕放入冷水盆中或冰箱中使其凝固。石蠟完全凝固后，倒出冷縮的蠟塊片，用加熱的外科刀按組織塊位置修整蠟片待用。

1.8 組織切片

不同的切片制備方法其切片方法也有較大差別，組織切片法包括石蠟切片法、冰凍切片法、火棉膠切片法、石蠟包埋半薄切片法、樹脂包埋薄切片法和大組織石蠟切片法等。常用的切片工具包括組織切片機、切片刀和自動磨刀機等。以下主要介紹石蠟切片法。

組織經石蠟包埋后制成的蠟塊用切片機制成切片的過程稱為石蠟切片，為目前病理診斷常用的切片制作方法。在切片前應先切去標本周圍過多的石蠟（此過程稱為修塊），但也不能留得太少，否則易造成組織破壞及連續切片時分片困難。一般切4～6 μm的切片，特殊情況可切1～2 μm。要觀察病變的連續性，可制作連續切片。除此之外，石蠟包埋的組織便于長期保存，因此石蠟切片仍是目前各種切片制作方法中最常用、最普遍的一種方法。

1.9 蘇木精―伊紅染色法

蘇木精―伊紅染色方法，簡稱HE染色方法，是生物學和醫學領域細胞與組織學研究最廣泛應用的染色方法。在病理學實驗中稱為常規染色方法。病理?胞和組織學的診斷、教學和研究都是用HE染色方法觀察正常和病變組織的形態結構。因此病理學工作者必須學習和掌握這種染色方法。

2 病理標本在專業教學中的應用

2.1 激發學生學習興趣、提高學生綜合能力

在動物病理實驗過程中，專業術語枯燥抽象，面對復雜的病理變化和發病機理，學生在學習過程中容易混淆病理學的某些基本概念，更不能準確運用到相關病理變化的組織學觀察中。為了更好解決這些問題，在觀察大體標本時，運用病例教學法，創設情境，舉出真實生動的臨例，吸引學生的注意力。因為每一個大體標本都擁有一個故事，這個故事生動、真實，看得見，摸得著，易于形成深刻的記憶，并起到激發學習興趣的作用，使學生在分析病例、觀察病變過程中帶著問題積極主動地查找資料，尋找答案，通過對病例標本的觀察與討論，可以培養學生分析問題、解決問題和創新的能力[3]。例如可以將實驗室收集的雞新城疫、雞馬立克、傳染性法氏囊、壞死性腸炎及沙門氏菌病等家禽常見疾病的標本分組，每類疾病標本貼上相同的代號，由學生對病理標本進行描述討論，并且根據病變組合判斷病因，寫出實驗報告[4]。最后，在進行歸納總結時，教師轉換為主講人，科學嚴謹地分析病例。

2.2 推進高校專業課程的考試及評價方式改革

目前高校的考試評價主要以期末考試的方式來評定，方式較單一，往往以書面的形式展開，考試內容則更注重基礎的理論知識，對學生知識的實際應用能力的重視不足，這樣的考試評價嚴重影響了學生的學習效果，使學生缺乏學習動力，使學生的所學知識和實際應用嚴重脫軌，嚴重阻礙了學生創造性思維的發展[5]。而動物標本的制作及應用過程可以以學生為主體，在整個過程可以對動物生理學、解剖學、病理學、臨床診斷學等多門課程進行考核，內容更加全面化，同時可以在標本制作過程中鍛煉學生的動手能力、案例分析能力、解決問題的能力，發掘學生的創新能力。并且可以考核學生的學習態度、素質等綜合能力，使考核評價方式多元化，由教師和學生共同參與，為學生建立起多元化的考試方式。同時，可以根據專業課的實際情況，對每名學生進行多門專業課程的綜合能力考核，讓學生更深刻理解一些專業知識的內在聯系，對課程橋梁的作用有更深刻的認識。

病理學診斷常用的方法范文6

乳腺癌是女性最常見的惡性腫瘤之一，我國女性乳腺癌發病率正在逐年增長，嚴重影響婦女身心健康甚至危及生命，早期診斷和恰當的臨床方案是成功治療乳腺癌的關鍵。HER-2/neu基因是乳腺癌的重要生物學標記，其過表達是乳腺癌發生的早期事件，對乳腺癌的轉化及轉移都起有重要作用，準確地檢測HER-2/neu基因的狀態是有效治療乳腺癌的前提。

乳腺癌的形態學和免疫組織化學觀察有時有較強的主觀性，比較宏觀，難以更精確地判斷，故兩者和分子病理學手段相結合對乳腺癌進行檢測成為當前臨床病理診斷的發展趨勢，近年來，這種三結合的診斷模式已在各大醫院及實驗室得到廣泛應用。各類乳腺癌的病理形態學特征是病理診斷的基石，免疫組織化學有助于鑒別診斷及進行組織學分類，而分子病理學技術檢測病理標本中乳腺癌特征性的分子標記則具有重要的參考價值。其中運用熒光原位雜交（FISH）技術檢測乳腺癌HER-2/neu基因的擴增是目前常用的乳腺癌的分子病理學方法之一，已經在國內外廣泛開展。

1HER-2/neu基因

人表皮生長因子受體2（human epidermal growth factor receptor 2，HER-2），又稱c-erbB-2，是100000個以上人類基因元之一，它存在于人類所有細胞的表面，該基因定位于人染色體17q12-q21，編碼一個185kD的跨膜酪氨酸激酶受體分子，調節細胞生長、生存、分化等過程。HER-2基因擴增永久的遺傳學改變特征會引起HER-2受體的持續表達，HER-2受體的過度表達不僅見于乳腺癌，也可見于其他腫瘤，如膀胱癌、消化道癌和肺癌等，它在腫瘤轉化和發生中都起著很關鍵的作用，可影響治療方案的選擇。

對于乳腺癌患者尤其是早期患者來說，HER-2被公認為是其預后評價中最有價值的分子個體特異性生物學信息之一，已有充分的臨床數據證明HER-2基因狀態對乳腺癌的預后、風險評估和治療等方面都有決定性的影響。治療方案的選擇取決于生物學標記的準確檢測及其結果的正確判讀。大量研究和治療規范都指出，HER-2狀態不同的患者，即使其他情況相似，也可能導致完全不同的治療方案，結合傳統的預后因素，如腫瘤大小、淋巴結轉移和其他因素，就可以選擇更有針對性的最佳個體化治療方案，確定未來是否可以選擇生物靶向治療的可行性，預測對很多化療方案（如蒽環類、紫杉類、CMF）的敏感性，在獲得更好治療效果的同時也可避免不必要的治療對患者造成的損害。隨著單克隆靶向治療藥物如赫塞汀等的應用，準確的HER-2評價更加重要。HER-2陽性是相關生物靶向治療的關鍵臨床指征，意味著對許多傳統化療和內分泌治療反應不佳，ASCD推薦每個原發性乳腺癌都應做HER-2 FISH檢測及評價[1]。

2免疫組織化學技術

免疫組織化學技術（Immunohistochemistry，IHC）主要檢測HER-2/neu蛋白水平，具有簡便、廉價、快速的優點，是各大醫院目前首選的檢測手段，但由于標本固定、處理過程中蛋白容易被破壞，不同抗體之間的差異，以及結果判斷的主觀性等，影響了IHC的準確性。

3FISH技術

熒光原位雜交（fluorescence in situ hybridization，FISH），是一種嶄新的生物學技術是利用非放射性標記核酸代替放射性標記核酸在染色體、細胞或組織切片上進行原位雜交，借助免疫細胞化學過程以熒光信號對雜交體加以檢測和定位的方法。由于該方法具有安全、靈敏、快速、高效和分辨率高等優點，所以發展異常迅速，應用非常廣泛[2]。

FISH法主要用于檢測HER-2/neu基因擴增，靈敏度、特異性非常高，且安全、快速、高效、分辨率高，在美國已是臨床上常用的標準檢測方法，對早期診斷乳腺癌、準確制定治療方案起決定性作用。但價格昂貴，直接影響了臨床應用，尤其是在我國現階段，該技術中的核心——標記探針完全依賴進口，使這項技術難以普及，國內相關研究工作均使用進口標記探針[3]。

4組織芯片技術

組織芯片（tissue chip）又稱組織微陣列（tissue microarray， TMA），它是將數十至上千個小組織按照設計，整齊地排列在一張載玻片上的技術，它的雛形源于Battifora在1986年報道的一種酷似“香腸形”的組織包埋法，而它的概念的提出及其實用價值的證實則是Kononen等在1998年首先明確的，之后受到病理學家和分子生物學家們的重視，廣泛應用于腫瘤病理學研究的各個方面并取得了很大的成功，作為一項生物學研究新技術，它已在醫學各個領域中顯示出巨大的發展潛力和廣闊的前景。

4.1組織芯片的優點：

4.1.1高通量、靈活：組織芯片雖然體積微小，但是信息含量很高，研究者可以根據研究內容、方法以及對照的不同自行設計樣本的數量、排列組合和布局等，僅在一張切片上就可以完成所有檢測工作，效率非常高。

4.1.2平行、可靠：組織芯片技術可以將數百上千例組織標本按照同一標準選材，并同置于一張切片上，為高通量原位分析提供了時間、空間和資源的平行性，減少了因實驗條件不同所造成的誤差，結果均一可靠。

4.1.3互補、可比：組織芯片不僅適用于形態學觀察，還可與IHC、FISH及基因芯片等技術互補結合進行研究；可以按照不同的實驗需要設置對照，可比性強。有利于對實驗結果的判定和實驗操作質量的控制。

4.1.4節省、利于原始蠟塊的保存，尤其是少見的病例標本。

4.2組織芯片的可行性：由于構成組織芯片的組織特別小，因此必然會出現這樣一個問題，即這些微小的組織能否代表它原來所對應的大組織？ 特別是在對有多種組織起源組成的腫瘤進行研究時，這個問題是很難避免的。不過，組織芯片是用于檢查腫瘤群體，而不是個體，他們對組織異源性的影響進行了組織芯片與普通切片的對比性研究，研究結果之間確實有一些差異，但是，這并不影響相關參數的確定，從普通切片中能觀察到的參數同樣也可以從組織芯片中得到，因此，可以推斷在大多數情況下從組織芯片中得到的研究結果應該能夠代表原組織，在不久的將來組織芯片很有可能取代普通切片用于科學研究[4]。

4.3組織芯片的應用

4.3.1尋找疾病基因及與腫瘤發生發展和預后相關的生物分子標記：組織芯片與基因芯片有很好的互補作用，兩者聯合使用能迅速地篩選基因和評估其生物學作用，有助于建立與診斷、治療和預后有關的參數。

4.3.2測試生物試劑：生產出的抗體和探針需要做特異性和敏感性測試，需要對大量不同來源的組織，陰性和陽性對照組織進行檢查，比普通切片而言，采用組織芯片測試，可以省時省力省財，一張組織芯片一次實驗即可完成。

4.3.3質量控制及標準化：90年代初在丹麥已開始采用多組織片進行免疫組織化學染色的質量控制和標準化。標準化的組織芯片由正常組織、各種陰陽性對照組織和不同固定條件處理的組織構成，能有效地評估抗體和探針的特異性和敏感性，以及組織固定、抗原修復和組織染色的情況。

4.3.4縮微組織學和病理學圖譜及教學考試：根據需要可制成各種組織芯片，如正常組織芯片、各種類型的腫瘤組織芯片、同一系統中的不同腫瘤組織芯片、少見腫瘤組織芯片、疑難病例組織芯片、非腫瘤組織芯片等。可用于組織胚胎學和病理學等形態學科教學，對年輕病理醫生和進修醫生教學和病理診斷水平測試。

4.3.5作乳腺癌HER-2檢測的陽性對照片：①組織芯片面積小，可與受測組織同在一張載玻片上，染色條件相同，且不影響受測組織的染色，因而更具可比性；②組織芯排列規整，方便閱片和查對；③組織芯片包含陰性和不同陽性程度的組織，比傳統的單一陽性對照更有效；④提供了判定受測組織得分的標準，降低了閱片者主觀不穩定性對結果判讀的影響[5]。

5前景瞻望

人們已越來越多地了解了HER-2在乳腺癌發生、發展、預后及治療中意義，同時也不斷地探索著其他相關檢測技術（顯色原位雜交、逆轉錄聚合酶鏈反應、ELISA等）用于HER-2臨床診斷的可行性。據報道，近來有一種新近開發的FISH信號自動掃描系統已被采用，這種系統可以進行自動圖像分析和信號計數，從而大大提高了分析效率，同時也在很大程度上推動了FISH技術在各個領域的廣泛應用。組織芯片技術與FISH技術結合應用不僅可以節省人力物力財力，還可以作為對普通切片免疫組化及FISH等檢測手段的質量控制手段，不僅在乳腺癌還在其他腫瘤的診斷和治療中都有無限寬廣的應用前景。

參考文獻

[1]郭慧琳. HER-2基因與乳腺癌綜合治療預后的關系.國外醫學腫瘤學分冊，2005，32（1）：38-41

[2]Sato-Kuwabara Y， Neves JI， Fregnani J， et a1. Evaluation of gene amplification and protein expression of HER-2/neu in esophageal squamous cell carcinoma using Fluorescence in situ Hybridization （FISH） and immunohistochemistry. BMC cancer， 2009， 9：6

[3]楊建峰， 王曉巖， 王用金. HER-2熒光原位雜交檢測對乳腺癌治療的影響. 中國煤炭工業醫學雜， 2008，11（8）： 1295