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分子生物學技術范文1

關鍵詞生物技術;分子生物學;教學改革

分子生物學是從分子水平上研究生命現象、生命本質及其規律的的科學，主要研究核酸、蛋白質等生物大分子的形態、結構特征及其重要性、規律性和相互關系的科學，是21世紀最具活力的生命科學之一。[1]目前，分子生物學是生物技術專業學生一門重要的專業必修課。因此，確定合理、科學的教學改革方案，優化、重組教學內容，精心設計教學方法和教學手段，對保證生物技術專業分子生物學課程教學質量具有重要意義。[2]

1分子生物學教學現狀

（1）分子生物學是生物技術專業的一門主要課程，教學單位往往會根據教師上課需求以及市場需求來選擇教材，然而，卻有可能忽略了對學生的接受能力以及理解程度的考慮。部分分子生物學教材內容高深莫測、專業詞匯多且與實際聯系不夠緊密，造成學生在學習過程中困難重重，嚴重降低了學生對該學科學習的積極性。（2）教學條件限制。在分子生物學課堂中，使用多媒體設備等教學手段對提高學生的學習積極性以及學習效果有明顯的促進作用。然而，部分教學單位由于教育資源分布不均勻，難以利用先進的教學手段。（3）分子生物學課程所涉及的知識點以及生物學過程，大多數是看不見摸不著的微觀世界，學生在學習的過程中難以直觀感受。（4）理論知識更新快，實驗技術發展快。分子生物學作為生命科學的前沿學科，其發展日新月異，這也對教學提出了更高的要求。授課老師需及時接納最新知識，充分備課。

2分子生物學教學改革的主要措施

2.1PBL教學法的合理運用

PBL（problem-basedlearning，問題式學習）教學法于1969年由美國Barrows教授創立，并引入高等教育，很快在高校中廣泛應用。是一種以問題為導向，以學生為中心的教學方法。其主要流程是：老師提出問題，學生作為主體進行分組討論，學生解決問題。[3]在PBL教學過程中，學生是主體，老師則主要起到輔導的作用。分子生物學課程內容復雜，用傳統的教學方式不易調動學生的學習積極性，而且課堂效率不高。在課堂中適當引入PBL教學法，可改善教師唱獨角戲，學生被動接受的狀況。在進行PBL教學前的備課過程中，任課老師應查閱大量的文獻，充分考慮在討論案例過程中可能出現的問題，內容涉及分子生物學以及其他學科如生物化學、細胞生物學等。在課堂上，教師應寓教于樂，充分調動學生積極性，控制好課堂節奏，同時應根據教學大綱的安排，強調學習過程中應掌握的知識要點。[4]在分子生物學的教學過程中，PBL教學可分為四個階段：（1）提出問題。開展PBL教學的時間不宜在課程開始的階段，而應在課程中后期，學生具有一定的分子生物學基礎后再開展。PBL教學討論的主要題目應該是分子生物學教學過程中的重點或者難點，并且結合生活實際的討論內容。教師在這個過程中是組織者的身份。（2）人員組成。為調動學生參與的積極性，同時考慮到團隊的高效性，將每個班級分成4~6組，每組包括4~6名同學。分組結束后，要求各組成員選拔出該組的組長并選定擬解決的問題，然后進行人員的分工，明確每個成員應完成的內容和時間節點。老師負責全程把控，掌握教學的整體節奏與進展，及時了解各組的情況，包括進程、主要觀點、存在問題、后續進展等。鼓勵各組結合自己的研究、思考提出自己的想法。對成效較好的小組，給予肯定和表揚；對存在問題較多或進展較慢的小組有針對性的指導，幫助小組找到解決問題的核心路徑。（3）成果展示。學生展示自己的研究成果，并開展充分討論。主講老師在學生討論完畢后，對學生的成果、討論的主題、各組的亮點、學生關注點較集中或爭議較大的問題、學生未掌握到的知識點、研究時未關注的部分、下一步學習或研究中需要改進的研究方法進行總結、歸納，并提出改進意見。[5]（4）考核評分?？己嗽u分是對PBL學生成果的集中體現，評分體系主要包括三部分：一是課件制作，占比30%，評價標準主要是內容正確、重點突出、課件美觀、清晰易懂，能綜合運用圖片、音頻、視頻、動畫等表達自己的觀點；二是課件展示，占比40%，準備充分、邏輯正確、條理分明、落落大分，能清晰的闡述自己的研究成果、觀點等；三是課堂討論：占比30%，主動思考，積極參與，能夠拋出富有啟發意義的論點，回答問題時中肯全面。

2.2提倡分組討論，開展小班教學

在討論課開始前2周，老師將要討論的內容告知學生。以小組為單位進行學習，各小組成員間可以進行分工協作，分頭尋找資料、討論并匯總；課堂上以小組形式提出問題，介紹小組觀點、結論，老師也會對該小組的匯報進行點評；課后以小組為單位進行復習，增強學習效果。小組學習活動的意義既體現個人的價值和責任，更強調成員間彼此賦予信心和力量，通過體驗團隊的智慧和協作，培養了學生間可貴的團隊合作精神。分子生物學的課堂提倡小班教學。一方面，可以增加師生間互動的頻率。由于分子生物學課程所涉及的知識點以及生物學過程，大多數是看不見摸不著的微觀世界，學生在學習的過程中難以直觀感受，這就增加了學生學習該課程的難度。小班教學有助于老師關注每一個學生對相關知識的把握；另一方面，小班教學易于實施多種教學形式，靈活掌握教學要求和進度，便于及時調整教學內容。

2.3利用網絡資源，提升自主學習能力

自主學習強調的學生作為知識的主動構造者自己進行學習的意愿和能力，反映了教學向個性化、創新化、自主化、多元化過渡的趨勢。分子生物學作為前沿科學，信息量大、更新快，要積極利用互聯網信息資源，提升學生學習和借鑒優秀研究成果、自主學習的能力。教師要由照著教材講變成開放式、啟發式教學，最大限度調動學生學習的積極性、思考的主動性、課堂的參與性。鼓勵學生自主學習，主動去學習和研究當前科研的最前沿知識，在研究的過程中敢于提出自己不同的看法，培養學生探索創新精神。[6]讓學生由被動受教變成自主學習，主動參與到課堂學習中，形成教學工作“教”與“學”相輔相成、相互促進。教師要積極拓展教學內容的外延，主動介紹國內外優秀的生物網站、資源庫、期刊、論壇等，鼓勵學生積極開展課外閱讀，豐富學科專業知識、前沿信息、專業詞匯等知識，激發學生探索新知識的熱情，也不斷培養學生自主學習、發現問題、解決問題的能力。[7]

2.4建立形成性評價體系

“形成性評價”的概念是由斯克里文1967年所著《評價方法論》中首先提出來的，與傳統的“終結性評價”不同，它是對學生的學習過程進行的評價，旨在確認學生的潛力，改進和發展學生的學習。因此，形成性評價方式更能體現出學生的學習效果。[8]分子生物學課程的目的在于培養學生形成良好的分子生物學學習習慣和實驗習慣，提高他們的科學素養和創新能力。期中或期末考試不能全面真實地反映出學生的真實學習情況，采取形成性評價的方式顯得更加科學和必要。具體如下：一是平時成績，占課程總成績60%，包括課堂考勤，占總成績5%、課堂作業，占總成績10%、課堂提問，占總成績5%、PBL討論會，占總成績10%、實驗考評，占總成績30%。二是期末考試，占課程總成績40%。由于形成性評價是強調過程的評價方式，引導學生重視平時的學習情況，大大減少了學生考前突擊的可能，也更能真實地反映出學生的真實水平。

2.5優化實驗教學體系

分子生物學實驗技術是生物技術專業學生必須掌握的重要基本技能之一。其研究方法及策略已被廣泛應用于生命科學的研究當中。[9]通過對學生實驗技能的培養，一方面有利于將理論教學與實踐教學相結合，豐富教學內容，提升教學的實踐性、實用性、綜合性，便于學生理解和掌握；另一方面，在提升學生綜合素質、學習興趣、創新能力、思考能力等方面也有十分重要的作用。[10]因此，增加分子生物學實驗學時數，開展綜合實驗也是課程改進的一個重要方向。在實驗教學中，教師要結合分子生物學快速發展的特點，選取與教學內容相適應的操作性、設計性實驗，并做好不同實驗之間的關聯與銜接，建立實驗的邏輯體系。一是分組分工，輔助實驗老師提前做好實驗準備工，并提前觀察、發現問題及時記錄。二是教師針對前期準備工作中發現的問題有針對性的闡述，并對實驗流程、操作方法、各環節中注意事項進行講解與演示，指導學生開展實驗。三是講解與演示結束后，學生動手實驗，教師應注意注意觀察過程和細節，對共性問題，要及時統一糾正，對個別同學的個性問題，要個別指導。既確保操作的準確性、嚴謹性，也要保證實驗質量，通過實驗檢驗教學情況。

3結語

生物技術專業應用人才培養是一個綜合性、系統性的工程，涉及到教育環節的方方面面。課程教學是其重要的一環，分子生物學課程教師要積極發揮作用，不斷提升專業能力、教學能力，教學理念與時俱進、教學手段豐富靈活，激發學生學習的主動性、創造性，提升學習內容掌握能力及應用效果，為國家培養知識、能力、素質協調統一的應用性、復合型人才。

參考文獻

[1]朱玉賢,李毅,鄭曉峰等.現代分子生物學(第四版)[M].北京:高等教育出版社,2013.

分子生物學技術范文2

【關鍵詞】 分子生物學；相關檢查技術；霍亂弧菌

霍亂是由霍亂弧菌感染引發的一種流行廣泛的甲類傳染病[1]。霍亂弧菌是腸道傳染病霍亂的病原體[2]。人類是霍亂弧菌的唯一易感者[3]。被感染者，往往表現為腹瀉、劇烈嘔吐、脫水、甚至死亡。從1817年至今，人類累計經歷了7次大規模流行的霍亂?；魜y，它具有起病急驟、傳播迅速、波及廣泛、病死率高等特點，霍亂弧菌廣泛的分布自然界中，可以通過污染水源及食物而引發疾病。對于霍亂的預防及治療的關鍵在于，及時監測疫區外環境標本。對霍亂弧菌做出迅速、準確的檢測是霍亂防治的重要方法。傳統的分離培養方法費時費力，不能適應疾病的快速發展，將分子生物學的相關檢測技術應用于對霍亂弧菌的檢測，可精準、快速的進行檢測，為疫情的處理，臨床診斷提供了及時可靠的依據，同時也可有效追蹤傳染源，確定霍亂菌株類型，預測霍亂的流行趨勢。本文將對幾種用于霍亂弧菌分子生物學檢測技術，作簡單的介紹。

1 PCR

PCR技術主要包括：普通PCR、熒光PCR、套式PCR、多重PCR等。

1.1 普通PCR 普通PCR是通過檢測出霍亂弧菌0139和01菌群的ctxA、ctxB基因，繼而檢測屬于霍亂弧菌并檢測出其毒力基因的常規方法。Shirai[4]依據LT和CT的高度同源性，建立了基于ctx基因的特異的PCR檢測方法，它檢測細菌染色體的靈敏度很高，能檢出僅含三個活菌的樣本。

1.2 熒光PCR 熒光定量PCR，它是通過熒光或者熒光燃料標記的特異探針，對PCR的產物進行跟蹤標記。它具有無需電泳、快速定量、無交叉污染等諸多優點，被廣泛的應用于臨床。應用熒光PCR可快速有效的檢測出霍亂弧菌0139群、01群、非0139群、非01群毒素的相關基因。

1.3 套式PCR 套式PCR，也可稱為巢式PCR，即使用兩對PRC引物來擴增完整的片段。套式PCR中，第一對引物擴增片段的方式與普通PCR極為相似，第二對引物也叫做巢式引物，他們往往結合在第一次PCR產物的內部，這就導致第二次PCR擴增的片段會短于第一次。巢式PCR，它具有非常高的特異性。Susanna等依據0139群O抗原合成相關基因片段建立的套式PCR可用于0139群霍亂弧菌的特異檢測[5]。

1.4 多重PCR 多重PCR，也可稱為復合PCR或者多重引物PCR，它是在同一個PCR反應體系中加入兩對及以上的引物，在同一時段，擴增出許多的核酸片段，它具有高效性、系統性、經濟便捷性等諸多優點。

2 AFLP

AFLP（擴增片段長度多態性）是一項新型的分子標記技術，是由荷蘭的Pieter Vos 等在1993年發展起來的一種多態性DNA檢測新方法，它具分析需要DNA含量少，可重復性好，多態性強，分辨率高，無放射線損害，適用性廣，穩定性好等諸多優點。AFLP技術的原理：對基因組酶切后的片段，進行選擇性擴增，已獲取的擴增片段經電泳檢測，繼而檢測出獲得的不同長度的擴增片段。Jiang[6]采用AFLP技術分析不同環境，不同地點的臨床分離的霍亂弧菌多態性，結果顯示分離的臨床0139菌株及01菌株在遺傳學關系上要比環境中的0139菌株及01菌株更為緊密。AFLP分析與PFGE、RFLP、RAPD、Rep-PCR等適應范圍相似，并兼備以上各種方法的優點，且分辨率極高，穩定性強，可為臨床工作提供豐富信息。

3 PFGE

PFGE（脈沖場凝膠電泳）是一種常用的分離大分子核酸的方法。用脈沖場凝膠電泳對霍亂弧菌進行分型，其分辨力更高，可為霍亂弧菌分離株間進行同源性分析、遺傳相關性分析、追蹤傳染源、預測疫情變化、防治措施的制定提供可靠依據。脈沖場凝膠電泳分辨力高，重復性好，即使在不同實驗室，所得結果仍具可比性。

4 MLST和MLEE

MLEE（多位點酶電泳法），它以一個基因一種酶學說為依據，通過監測酶電荷及分子量的變化情況，來推算對應位點的多態性，然后進行綜合分析，從而獲悉細菌的具體分型及遺傳學特點。但是，不同實驗室間結果不可進行比較。

MLST（多位點序列分析），是一種新型的細菌分型技術，它由MLEE改良而來，它比PFGE的分辨力更高。

5 MLVA

MLVA（多位點可變數目串聯重復序列），是在PCR基礎上發展起來的新型技術，具有高度多態性的特點。對DNA的純度要求不高，特異性高，重復性好，可得到數字化的結果，可進行實驗室間比對，且可在短時間內大量的處理樣品。

6 討 論

PCR技術具有特異性強、靈敏度高、檢測快速、成本低廉等諸多優點，但是，在菌株遺傳關系分析及菌株分型方面不如其他的分子生物學檢測手段，所以，PCR技術在臨床主要被應用于早期對菌株的篩查。AFLP技術是以PCR技術為基礎的新型技術，它繼承了PCR的優勢，但更加的可靠，與PCR相比，它可同時檢測出大量不同的核酸片段，一次擴增就能分析比較幾十個甚至百個基因位點，且不需制備探針，不需預知基因的序列特點。但，AFLP技術價格昂貴，對DNA純度，內切酶質量有很高的要求，模板反應往往遲鈍，還可能發生缺失或錯配的現象。與AFLP技術相比PFGE是一種操作簡便、穩定性好、分辨力高的方法。PFGE已經被公認為多種細菌基因分型的標準，是目前較為成熟的基因分型方法。但，PFGE技術也具有一定的局限性，如耗時久，未形成國際同一標準，不利于實驗室間比較等。PFGE技術與MLST相比，MLST建立有大型的國際化數據庫，可以進行實驗室間的比對，也可作為國際流行病研究的依據。但MLST技術費用高，工作量大，技術要求極為嚴格，設備昂貴，所以并不適用于暴發流行的常規檢測。MLVA是以PCR為基礎的新型分型方法，它對DNA的純度要求不高，特異性高，重復性好，可得到數字化的結果，可進行實驗室間比對，且可在短時間內大量的處理樣品。

綜上所述，各種分子生物學檢測手法各有千秋，可以互相取長補短，我們可以根據檢測的目的以及實驗室的現有設備選取合適的方法，用于臨床診斷及研究。

參考文獻

[1] 鞏西玲.兩種霍亂弧菌檢測技術的應用研究[J].適宜技能，2013，21（12）：134-134.

[2] 吳以華，徐景野，李岳良，等.微量培養板不同保存時間對霍亂弧菌培養效果的觀察[J].中國衛生檢驗雜志，2007，27（4）：629-630.

[3] 熊長輝.霍亂弧菌分子生物學檢測技術介紹[J].現代預防醫學，2012，39（17）：4536-4537.

[4] Shirai H，NishibuchiM，Ramamurthy T，et al.Polymerase chain reaction for detection of the cholera enterotoxin operon of Vibracularia[J].J Clin Micro bio，1991，（29）：2517.

分子生物學技術范文3

生物技術專業 分子生物學 實驗教學 改革

分子生物學實驗，是分子生物學理論的實踐環節，也是培養創新型人才的重要途徑，不僅在研究生教學中受到普遍重視，在本科生教學中也受到高度重視。但由于客觀條件的限制，生物技術專業的分子生物學實驗教學還存在諸多問題，比如現有教材不適合于本科教學、實驗缺乏設計性和綜合性等，嚴重影響了實驗教學的效果。因此，分子生物學實驗教學的改革勢在必行。

一、完善實驗教材建設

近年來，隨著分子生物學技術的發展和出版業的發展，市場上涌現出大量相關的實驗教材，但往往偏重于對實驗步驟的編寫，或者所選的實驗項目過于專業化，不適合在本科教學中運用。實驗指導教師應不斷完善實驗教材的建設，使之既適應于本科生實驗教學平臺，又注重與基因工程、酶工程、發酵工程等課程的實驗項目的銜接，充分體現生物技術專業核心課程的關聯性。在編寫教材時，還要盡量做到圖文并茂，通俗易懂，特別是要注重對實驗原理的闡述。

二、加強實驗的設計性和綜合性

設計性實驗和綜合性實驗有利于培養學生的創新能力。分子生物學實驗課程主要圍繞“DNA重組技術”展開，各個實驗項目既具有一定的獨立性，又具有很強的連貫性，這種連貫性表明，這一系列的實驗在操作之前就帶有較強的設計性，在學生進入實驗教程之前，可以此作為范例，介紹DNA重組實驗的設計思路和關鍵問題，積極引導學生查閱資料，獨立設計全部或部分實驗方案，并對這些設計進行剖析和點評。實驗室網絡的開通，能夠更好地發揮計算機輔助實驗教學的功能，為設計性實驗的教學提供了極大的便利。比如，可以利用在線軟件分析目的基因的酶切位點，或利用相關軟件設計PCR引物等。綜合性實驗是培養學生獨立操作能力和綜合應用能力的重要環節。通過“質粒DNA的提取和檢測”、“質粒的酶切分析”等實驗，學生已基本掌握了相關原理和技術，而隨后的“重組子的篩選與鑒定”實驗，仍然需要使用質粒DNA提取、酶切、電泳等技術，帶有很強的綜合性，可借以培養和考核學生獨立操作、綜合應用的能力。此外，篩選和鑒定重組子又有多種方法，可設計不同的實驗方案。因此，該實驗在教學中又可作為一個設計性實驗，只要學生設計的方案具有可行性，就應當盡量提供條件，讓學生按照自己設計的方案完成實驗。

三、優化實驗教學方法

“教無定法，貴在得法”，但這“法”首先因立足于學科特點，并在教學實踐中不斷探索和優化。筆者結合實際工作經驗，對分子生物學實驗的教學方法作初步探討。

1.集中時間，小班開課

“DNA重組技術”的各項實驗相對獨立，但無論在邏輯上還是在時間上，前后都是緊密關聯的，如果像其他課程的實驗那樣每周做一個的話，很難取得理想的結果。因此，較為合理的安排就是集中時間授課，在兩周內完成整個DNA重組實驗。這種安排既使學生在操作時目標明確，也因其符合科研的節奏而使學生能更好地體驗科研的氛圍和樂趣。在本科生的分子生物學實驗教學中，普遍面臨著儀器臺套數有限、指導教師少、學生人數多等突出問題，小班開課可有效緩解眾多學生與有限的教學資源之間的矛盾，提高實驗教學的質量。小班開課時，每批以10個左右學生為宜。

2.集中講解，個別指導

在每次實驗前，應集中講解實驗原理，把本質問題講解透徹，也應分析實驗步驟，并針對關鍵操作、技術難點或容易誤解之處進行演示，使學生能更好地掌握實驗原理和技術，并在實驗前做到“胸有成竹”。盡管按照同樣的實驗手冊操作，但每個學生可能會遇到不同的問題，這時指導教師應隨時關注每個學生的狀態，及時解答學生的疑問，或及時指出其錯誤的或不規范的操作，并予以糾正。上文所說的小班開課，可保證指導教師有足夠的時間和精力來實現個別指導。

3.落實預習，及時總結

如果不作強調，學生很容易忽視實驗課程的預習，在動手操作時看一步做一步，這樣既容易出錯，又看不到各個步驟之間的銜接，看不到實驗的整體和精髓，致使實驗結果和教學效果均不理想。因此，在每次實驗前，應布置具體的預習任務，包括實驗原理、實驗步驟、注意事項等，并在實驗講解時隨時提問，以檢查預習效果，確保學生在進入實驗室之前就熟悉相關內容，特別是應明確本次實驗要做什么，明確本次實驗在整個實驗教程中所處的地位。在重視實驗預習的同時，也要重視實驗總結。實驗的總結可安排在實驗間隙，也可安排在實驗結束之后，宜采用討論的方式。可先由學生自己總結經驗，提出實驗中遇到的問題并進行分析，在此基礎上再由指導教師進行概括和補充，分析實驗中存在的普遍問題、特殊問題及其成因，以促進學生分析和解決問題能力的提高。此外，指導教師還應及時評價實驗教學的效果，以期在下次開課時進一步完善。

4.拓寬思路，廣開渠道

Southern雜交、DNA測序等技術，對設備要求高，實驗流程長，難以作為本科生實驗教學的內容，但是作為生物技術專業的學生，又有必要對這些重要技術有較為深刻的認識。因此，在實驗教學中應拓寬思路，綜合利用多種渠道，直接或間接地傳授這些技術。多媒體是拓寬實驗教學的重要手段，可用于演示那些重要的但不能開設的實驗，拓寬學生的知識面。如果能參觀本校或兄弟院校的實驗室，并在現場講解或演示實驗，則可使學生形成更為直觀的認識。此外，對于學有余力的學生，還需因材施教，積極引導，重點提拔，鼓勵他們參與預實驗，觀摩教師的科研工作，或指導他們參與大學生科研立項，也即引導他們從課堂實驗走向科學研究，為培養創新型人才打下堅實基礎。

四、完善實驗考核體系

實驗教學的考核是客觀評價學生所掌握的理論和技能的重要手段，也是提高實驗教學質量的有效措施。分子生物學實驗應注重全面考查學生的素質，不僅要考查學生所掌握的基本知識和技能，還要考查學生獨立思考和綜合運用的能力，以及在實驗操作中表現出來的認真的態度，實事求是的科學作風和團隊合作精神等。因此，在教學中應以“公平、公正”為原則，不斷探索和完善實驗考核體系。

參考文獻：

[1]楊清玲，陳昌杰等.本科生分子生物學實驗教學改革的實踐和體會[J].山西醫科大學學報（基礎醫學教育版），2007.

[2]曹華，裴鵬等.分子生物學實驗教學中創新能力的培養[J].醫學教育探索，2006.

分子生物學技術范文4

新生兒溶血病（heamolytic disease of the fetus and the newborn, HDN）是發生在胎兒和早期新生兒的一種自限性免疫溶血性疾病，該病由母嬰血型不合引起，常導致胎兒早期流產或新生兒出現貧血、水腫、肝脾腫大甚至造成新生兒死亡等嚴重后果。由于我國RhD（-）人群僅占0.24%，大大低于白種人的15%，因而在我國Rh血型不合引起的HDN較ABO為少見，而Rh血型D抗原卻又是引起中度和重度HDN的最常見原因［1］。目前，血型血清學與分子生物學技術是臨床進行新生兒產前診斷最簡便常見、實用有效的方法，正確運用血清學與分子生物學技術，可以為HDN預防及診斷提供有價值的依據，從而指導臨床采取相應措施，防止HDN的發生。

1 血型血清學方法

為預防及避免HDN的發生，妊娠婦女除行常規的產前檢查外，還應包括妊娠史、流產史、HDN史及夫妻雙方的ABO和Rh血型的鑒定、不規則抗體篩選。如RhD為陰性時，應做弱D檢測，以避免漏檢。一般應在孕16周、28周、36周時各進行1次抗體篩選，當檢測到有臨床意義的同種抗體時，應測定IAT（indirect antibody test）滴度，以評估抗體水平并動態監控其變化。盡管有研究表明，HDN的發病率隨母體內抗-A/B或抗-RhD水平的升高而遞增，但仍有一些高抗體水平的個體并沒有發生HDN而一些低抗體水平的個體發生了中至重度的HDN［2，3］。對那些有過流產史、HDN史的孕婦，應該密切注意其體內的血清抗體水平。

如免疫性ABO抗體效價≥64，且無流產史及HDN史時，可每4周檢查一次抗體濃度；如ABO抗體效價≥256，為可疑HDN；ABO抗體效價≥512者，為高度可疑；如既往有HDN史且本次ABO抗體效價≥512時，建議換血治療。

如Rh抗體效價≥8時，為可疑HDN，建議復查，≥16時可行羊膜穿刺術進一步檢測其羊水膽紅素含量，因為此時胎兒可能已經發生中度貧血［4，5］，必要時換血。

血清學方法可用于孕婦在懷孕早期的弱抗體檢測，具有較好的靈敏度，但其局限性在于實驗須在標準化條件下進行，且檢測出來的抗體滴度與HDN疾病嚴重程度之間的相關關系仍然欠缺。

2 分子生物學方法

運用PCR-序列特異性引物（sequence specific primer,SSP）、PCR-限制片段長度多態性（restriction fragment length polymorphisms, RFLP）等分子生物學技術可從懷孕16周的孕婦羊水細胞中檢測出胎兒的血型基因，此技術已常規運用于臨床檢測胎兒RhD、RhCE、KEL、Fy等基因［6，7］。對于有HDN史或流產史的婦女，且其丈夫基因為雜合型者，該技術可以更早、更準確地預測胎兒的血型基因型，可選擇性地終止RhD陽性胎兒的妊娠，避免對RhD陰性胎兒的一些侵入性損害檢查。在ABO溶血病的預測中，如母為O型，父為AO/BO型的夫婦，檢測其胎兒ABO血型基因型，如胎兒為O型，則完全可以排除HDN發生的可能，避免其他不必要的檢測；如胎兒為AO/BO基因型，則提示有發生HDN的可能，從而指導臨床在必要時進行其他檢測。

3 綜合診斷及評價

評估HDN的發生，如結合妊娠史及HDN史、孕婦同種抗體動態水平、胎兒血型基因型預測、抗體功能活性測定等進行綜合判斷，可將HDN預測準確性提高到95%［8］。綜合診斷及評價方法為（1）流產史、HDN史；（2）母血型為O/RhD（-），父為A或B或AB/RhD（+）；（3）孕婦妊娠期抗-A/B或抗-D水平的變化：①ABO抗體效價≥64時，建議復查；≥256時，可疑HDN；≥512時，高度懷疑HDN；既往HDN史且本次≥512時，建議換血。②RhD抗體效價≥8時，會有中度HDN風險；≥16時，很危險，可考慮換血；③高危病例可采集羊水用PCR方法進行早期基因定型。

［參考文獻］

1 李勇，楊貴貞.人類紅細胞血型學理論與實驗技術.北京:中國科學技術出版社,1999,173-181.

2 Voak D, Mitchell R, Scott M, et al. Guidelines for blood grouping and red cell antibody testing during pregnancy. Transfusion Med,1996,6:71.

3 Hadley AG.A comparision of in vitro tests for predicting the severity of heamolytic disease of the fetus and the newborn. Vox Sang，1998,74（Suppl 2）:375.

4 Clark AC. Red cell antibodies in pregnancy evidence overturned. Lancet,1996,347:485.

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6 Bowman J. The management of heamolytic disease of the fetus and newborn. Semin Perinatol,1997,21（1）:39.

分子生物學技術范文5

[關鍵詞] 中藥學研究生；分子生物技術；知識結構；醫學教育

[中圖分類號] G643 [文獻標識碼] C [文章編號] 1674-4721（2012）02（c）-0153-02

Improve the knowledge structure of graduates by strengthening the study of molecular biotechnology

WANG Lili DAI Liping CHEN Suiqing

Pharmacy College of Henan University of TCM, Zhengzhou 450008, China

[Abstract] In order to improve the knowledge structure, research and innovation ability of graduates who major in traditional Chinese medicine, a variety of ways and means were performed to enhance their study in molecular biotechnology, these ways include basic theory strengthening, experimental ability training, cooperation with enterprise etc..

[Key words] Graduate; Molecular biotechnology; Knowledge structure; Medical education

幾千年來，中醫藥已形成獨特的、系統的醫藥學理論，其中，中藥學傳統理論是中藥體系中不可或缺的重要組成部分，是中藥學教育的核心體系。但是如果我國的醫藥教育尤其是中藥研究生教育仍停留在傳統的中藥學知識教育的層面上，將會面臨知識結構落伍的困境。目前，大量在讀碩士研究生已逐漸成為中藥科技創新體系中的生力軍，因此，研究生教育關系到國家自主創新能力的提升，意義重大[1]。當今分子生物技術、基因工程技術的發展日新月異，為中藥的發展增添了新的驅動力。以中藥材為例，分子生物技術在中藥栽培、育種，建立動植物基因庫，稀缺天然成分的轉化，貴重藥材的分子鑒別，藥材的種質資源研究等方面取得了重大進展。因此，加強對現代分子生物學技術的研究，從基因水平上對中藥材進行分析和鑒別，是現代研究生需要掌握的一項基本技能。在《中國藥典》2010年版中已經收載了蘄蛇和烏梢蛇的聚合酶鏈式（PCR）的鑒別方法[2]，由此可見，生物技術已經成為中藥研究生教育的必修課。為了培養和促進研究生對現代生物技術的掌握，本研究室為中藥學專業研究生開辟了多條途徑，以期能夠完善其知識結構，提高其科研能力和水平。

1 加強基礎生物學課程的學習

由長期在科研和教學一線工作的教師來進行《現代生物技術》、《分子生藥學》和《生物工程技術概論》等基礎課程的講授，注重基礎理論知識和基本理論的講解。由于生物技術發展迅速，時效性較強，任課教師應及時查閱國內外該學科的新進展、新技術、新方法，并對這些新技術、新方法進行大致分析與介紹，突出其在中藥研究中的意義，盡可能使課程內容與最新的前沿研究同步，使研究生盡可能接觸最新的研究進展，拓寬科研思路。同時，本學科的發展和分子生物技術的結合應該作為重點內容來講述。以中藥質量標準為例，分子生物學手段特別是DNA分子遺傳標記技術，可從分子水平鑒別藥材主流品種及其種下等級的遺傳背景差異，為生藥品種標準化提供先進可行的方法和穩定可靠的標準，進而為中藥質量標準規范化奠定堅實的基礎。近年分子診斷技術也廣泛應用于生藥的鑒別中，限制性片段長度多態性（RFLP）分析、隨機擴展多態性DNA（RAPD）分析、擴增片段長度多態性（AFLP）技術等的出現，為生藥的鑒別特別是貴重藥材的鑒別提供了分子水平的依據。與此同時，應該培養研究生的閱讀能力，為其介紹國內外一流的分子醫藥學期刊及網站，加強其文獻檢索的能力，擴大其眼界和知識面。

2 通過多種途徑，培養研究生的動手能力

動手能力是科研能力的重要保證之一，是實驗研究能力和實驗創新能力的基礎。為了提高研究生的實際操作能力，使研究生在理論學習階段提前進入實驗室進行實際操作訓練。本校中藥學實驗室開展了分子中藥鑒定、細胞培養等多個方向的研究生課題，使研究生在學習理論知識的同時，了解PCR擴增、蛋白質電泳、植物愈傷組織培養、細胞培養等的基本原理和操作規程，從而提高理論和實際動手能力，在實際操作中，發現問題，解決問題，提高科研能力和水平。以PCR擴增為例，首先需要了解微量移液器、PCR擴增儀等儀器的使用方法，該實驗實際操作過程繁瑣，試劑種類較多，試劑量是以微升進行計量，加入量有時肉眼難以看到，對操作者要求較高。因此，必須對研究生進行實驗操作規程和技能的訓練，培養其觀察和分析問題的能力，使其能夠獨立解決實驗過程中出現的異?，F象和問題，增強科研實踐和創新能力。

3 加強與外單位科研院所合作交流

定期選派研究生赴中國醫學科學院等合作單位進行中藥生物工程技術方面的學習與交流，鼓勵和支持研究生參加高水平學術交流活動，為研究生提供更多更優質的創新平臺與機會。充分利用校外優質資源， 擴大學校與政府、科研院所、企事業單位的研究生聯合培養，加強教育科研資源的整合，科學發揮科研中心的高層次教育功能，加強與生物醫藥公司的合作，形成產、學、研一條龍，共同培養中藥行業需求的高層次應用型、復合型人才。

4 組織研究生到生物制藥企業、農業生物園區等參觀見習

為了使研究生加深對生物藥品生產過程的了解，應該組織研究生到生物制藥企業進行參觀見習，提供企業和研究生深層次交流的機會。通過這樣的交流，研究生可以更多的了解企業需求，針對企業生產過程中需要的知識進行學習調整，使研究生明確如何適應企業要求找到適合自己的崗位，為以后順利就業打下基礎。企業也可以把技術革新等方面的需求反映給研究生，增強研究生的創新實踐能力，為其研究思路指明方向。通過參觀學習，可以開拓研究生的思維，刺激其學習興趣，增強其在實用技術方面創新的能力。這樣既增加研究生的就業機會，也使企業得到充足的人才儲備，達到校企雙贏。

研究生學習階段的一個重要任務就是拓寬研究視野，結合自己的研究方向及時更新和調整知識結構，及時把握本學科發展的大致方向與研究方法。隨著現代生物工程技術的發展，一批新興的交叉學科應運而生，中藥的研究也面臨著諸多挑戰[3-4]，生物工程技術發展使中藥栽培、中藥鑒別等達到了分子及細胞水平，因此，加強分子生物技術的學習，對中藥學研究生知識結構的構建有著重大意義。

[參考文獻]

[1] 段文卓，孫宏偉. 提高普通高校研究生培養質量方法初探[J]. 中國高等醫學教育，2010（10）：108.

[2] 國家藥典委員會. 中華人民共和國藥典[M]. 北京：中國醫藥科技出版社，2010.

[3] 肖培根，王永炎. 加速中藥研究的創新步伐[J]. 中國中藥雜志，2010， 35（16）：1047.

分子生物學技術范文6

關鍵詞：分子生物學；教學改革；經驗介紹

中圖分類號：G642.0 文獻標志碼：A 文章編號：1674-9324（2015）31-0176-02

分子生物學主要研究DNA的復制、轉錄、蛋白質的翻譯及其相關調控規律的學科，它是高等學校生物相關專業開設的核心課程之一。雖然分子生物學是近二十年才被寫入高校生物類及相關專業本科及研究生培養大綱，但是分子生物學已成為生物類等很多專業的核心專業課程之一。分子生物學理論和實驗結合最緊密的課程之一，不但是生物科學和其他生物技術專業的基礎課，而且廣泛應用于生命科學實驗的各個領域。分子生物學這門課程內容繁雜，微觀概念繁多，并且其理論體系演變發展很快，也對其課程教學帶來了巨大的挑戰。

筆者長期從事分子生物學課程的理論和實驗技術的教學工作。在教學過程中，結合該課程微觀概念繁多、抽象性強等特點，從教材的選用、內容、以及教學方法等幾個方面進行了探索研究，并取得了一些成效。以下對教學改革的幾點措施以及體會和認識進行具體的描述。

一、精心選擇有關教材和參考書

教材是學生“學”和教師“教”的過程中的基本資料，市面上關于分子生物學的教材十分多。由于分子生物學所包涵的知識面十分廣，在編寫教材時有不同的側重點，因此選用一本合適的教材十分重要。通常要求教材既能涵蓋分子生物學基本概念與基礎知識，同時又能反映學科的發展動態，體現學校的辦學特色。分子生物學是我校較早實行雙語教學的課程之一，根據學生的實際水平選擇了科學出版社影印出版的英國經典分子生物學教材《Molecular Biology》（Turner）。本教材按主題，采用言簡意賅的語言和簡明清晰的圖表，系統概括了分子生物學的核心內容、主要技術及前沿動態。而且，此教材有中文譯本，可以幫助學生快速準確獲得信息，十分適合作為雙語課程的教材。

二、優化教學內容

由于目前大多數生物學課程，如遺傳學、生物化學、細胞生物學等都進入了微觀分子時代，因此均增加了蛋白質、核酸、基因表達調控等基礎知識的講解。這使得學生對開設在高年級的分子生物學有一些似曾相識的感覺。這雖然有助于學生對分子生物學的理解，但是也會使學生感覺好多內容是對前面的復習，出現厭學情緒。針對這種情況，我們邀請遺傳學、生物化學、細胞生物學等可能涉及分子生物學內容課程的主要負責人，認真討論，優化了各自的教學大綱，在保證課程內容完整性的前提下，盡量壓縮分子生物學的相關內容。對于教學過程中，生物化學、遺傳學和遺傳學中必須出現的分子生物學內容，如蛋白質核酸的結構與組成，采用分組討論的方式進行自學，調動學生的學習積極性，因勢利導，使學生對所學知識能夠更加理解，對所學知識的記憶和理解能夠進一步加深，為以后對相關知識點的學習打下良好基礎。與此同時，這既節約了教學時間，又不會再出現與遺傳學和生物化學有相同內容的重復教學問題。這樣，一方面對分子生物學的教學重點進行了明確，另一方面又突出了分子生物學的教學特點，即以遺傳學和分子生物學為基礎，保證了教學課程的系統性和完整性。

三、合理使用多媒體課件

分子生物學理論課教學內容多，而且抽象，因此學生很難熟練掌握和理解。另外，分子生物學又有著很強的技術性。其原理十分復雜、難度高，很難進行試驗操作且成本很高，這樣可以利用教學課件中的相關圖像及動畫來進行演示，提高學生的學習興趣。教師還可根據學生的個性特點以及接受能力來選擇合適的多媒體課件配合內容的講解，文、聲、圖、像并茂的新聞課件能夠從多個角度分層次地展現教學內容，使學生更加容易理解相關知識，從而提高教學質量。美觀清晰的多媒體界面，逼真的動畫模擬更加方便教師在教學過程中的使用。通過多媒體向學生提供信息，是對學生進行多種感官的綜合刺激，在獲取信息的過程中，學生通過聽覺、視覺等多方面的并用，更加容易使學生在學習中進行想象和創新，提高學生的學習積極性和創新能力。

但是，在教學過程中使用多媒體時，應注意它只是一種教學手段，是為教師的教和學生的學服務的。教師不能一味地讓學生時刻跟著多媒體，只是做一個多媒體的操作員。所以，在多媒體教學過程中，教師要把多媒體當一種教學輔助手段，同時要注意給學生思考和討論的機會和時間，培養學生的創新思維，重視學生的主體地位。

四、剖析經典實驗

分子生物學是所有生物學學科相關課程中，最注重實驗研究的課程之一。目前，現代分子生物學的理論發展的過程，實際上是前人大量實驗發現的科學闡述集合，比如轉座子的發現、RNA干擾現象及其機制的發現等。這些設計巧妙的實驗，有著嚴謹的論述，其中的一些研究方法如今仍然在分子生物學的研究中廣泛應用，如RNA干擾。這些經典實驗過程本身就是一個科學故事，在很大程度上提高學生對相關領域的興趣，其實驗設計可以啟發學生尋找解決問題的方法，也可以幫助學生在專業課程的學習中了解研究方法，從而加深對相關理論知識的理解和掌握。

同時，分子生物學本身仍在不斷地完善當中。相關的知識內容、發現和研究方式方法日新月異。如對非編碼RNA的研究已經成為目前對分子生物學進行研究的特點。將用故事的相識對非編碼RNA的研究歷史進行講述，進而采用啟發的方式對學生進行引導，討論在研究中對這一作用的應用。這樣的起發過程，可以增加學生對現代生物學研究中理論與技術相互促進發展的理解，激勵他們對已學知識的充分思考，建立基礎研究與社會應用之間的聯系，提高學生的創新能力和學習積極性。

五、利用科研實例剖析重點難點問題

分子生物學雖然理論很高深，但是它卻被廣泛應用于各種領域。特別值得一提的，如今各高校的教師有著較高的學歷和豐富的科研經歷，能夠在教學過程中融入實際的科研案例。在教學中對書本知識進行傳授的同時，為學生講解講授一些在實際工作中應用理論知識的實例，對學生知識的靈活運用能力的提高有很大幫助，可以為他們今后的工作和實踐奠定基礎。從課堂教學效果來說，有助于激發學生的學習積極性，并增強他們對重點知識的掌握理解。除此之外，也有助于提高學生對所學知識的應用能力，為以后的工作和實踐奠定基礎。

如可能的話，教師可以介紹自己研究團隊的一些有趣的研究。比如筆者所在的團隊，是搞泌乳調控機制的研究的。首先，向學生簡單介紹研究泌乳調控機制的背景（泌乳對母親和嬰兒的重要作用）。我們在研究過程中發現一個小RNA對泌乳調控有重要作用，它可以影響乳蛋白的合成。進一步向學生介紹這個實驗的設計思路，研究過程中所采用的試驗方法。這種講解，可以使學生對小RNA有深刻的印象，大大激發他們的科研興趣。

六、實行雙語教學

分子生物學，可以說是發展最快的生物學領域，因此分子生物學課程內容相應地也在迅速更新。大多數分子生物學的新發現，主要以英文論文形式發表在各種期刊雜志及其他媒體上。這要求教師不光要給學生講授分子生物學的理論內容，同時還要培養學生通過英文雜志媒體了解、掌握分子生物學的前沿進展。雙語教學在分子生物學教學過程中體現了很大的優勢。我校分子生物學課程組自2004年起開始了雙語教學的嘗試，積累了一些經驗。首先，在教材方面，我們選用了內容簡潔的英國經典分子生物學教材《Molecular Biology》（Turner）。該教材涵蓋了分子生物學絕大多數的基本知識點，且篇幅較短，特別適合本科生使用。第二，在教學方法方面，采用循序漸進、分步實施的辦法。即開始是中英文對照，逐漸改為全英文，讓學生逐步適應，減少因畏懼產生厭學。教學過程中，采用多媒體教學手段，教學課件中盡量多選用形象、精美的圖片，將高深的抽象概念轉變成直觀的圖像、動畫，調動學生的學習積極性。注意搜集國外分子生物學視頻，特別是一些標準英文配音的動畫視頻。這些動畫視頻形象地把一些分子生物學過程展示給同學，極大引起學生的興趣。視頻所配的標準英文介紹，可以幫助學生糾正一些專業詞匯的正確讀音，演示后，教師加以中文解釋可進一步加深學生對相關知識的理解。

參考文獻：

[1]王子健，張超，劉群紅.生物化學和分子生物學課程整合的教學探索[J].基礎醫學教育，2011，13（12）：1061-1063.

[2]Weaver.R.F.分子生物學[M].鄭用璉，譯.北京：科學出版社，2010.

[3]謝兆輝.小RNAs作用機制的研究進展[J].遺傳，2009，31（12）：1205-1213.